呋喃妥因代谢物检测试剂盒

一、呋喃妥因代谢物检测试剂盒概要

硝基呋喃类药物因其具有价格便宜、抗效果好等特点,曾经被广泛应用，作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。但在长时间的实验研究过程中发现，硝基呋喃类药物和代谢物均可以使实验动物发生癌变和基因突变，为了保证人类的食品安全,目前各国已禁止硝基呋喃类药物作为药物添加剂添加至动物饲料中。

二、呋喃妥因代谢物检测试剂盒原理

呋喃妥因快速检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测蜂蜜、鱼、虾、禽、肝脏等中的呋喃妥因代谢物（AHD），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的呋喃妥因代谢物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗呋喃妥因代谢物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含呋喃妥因代谢物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中呋喃妥因代谢物的残留量。

四、 技术指标

1 试剂盒灵敏度：0.05ppb(ng/ml)

2 反应模式：25℃，45min～15min。

3 检测下限：

组织、肝脏：0.1ppb     蜂蜜、牛奶、肠衣：0.1ppb  鱼/虾等水产品组织因有一定干扰，定量下限为0.15ppb

4 交叉反应率：

呋喃妥因代谢物：100%      呋喃唑酮代谢物：<0.1%   呋喃它酮代谢物：<0.1%     呋喃西林代谢物：<0.1%

5 样本回收率：

组织、肝脏： 80±25% 蜂蜜、牛奶、肠衣：75±15%

五、呋喃妥因快速检测试剂盒组成

酶标板、标准液（6个）、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩洗涤液、复溶液

六、贮藏条件及保存期

储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，不要冷冻。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

奶粉、蛋粉样本处理方法

1）称取1±0.05g均质样于离心管中，加入4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；

2）在37℃过夜孵育(约16小时)或50℃（超过50℃时会影响分层效果）水浴孵育3小时；

3）加250ul 亚硝基铁钠溶液（配液1）振荡混合30秒，加250ul 硫酸锌溶液（配液2）振荡混合30秒，15℃4000转/分离心10分钟；

4）取全部上清到另一个离心管中，后续接“5.3.1 牛奶样本处理方法，4）”

样本稀释倍数为2    检测下限：0.04ppb

蜂蜜、组织、肠衣、肝脏、饲料、鸡蛋样本处理方法

1）称取1±0.05g均质样于离心管中，加入4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；

2）后续接“5.3.1 牛奶样本处理方法，3）”

样本稀释倍数为2    检测下限：0.04ppb

熟食样本处理方法

1）称取1±0.05g均质样于50ml离心管中，加入4.5ml甲醇和0.5ml去离子水，振荡2min，室温4000转/分，离心5分钟，去除全部液体；

2）加入5ml乙腈和5ml正己烷，振荡2min，室温4000转/分，离心5分钟，去除全部液体；

3）在沉淀中加入4ml去离子水、0.5 ml 1M 盐酸溶液和100μl衍生化试剂，振荡5分钟；

注：熟食的添加回收试验请在此步加入高标准。