pET28a-mCherry

载体用途：荧光蛋白报告载体（原核）；大肠杆菌荧光质粒；大肠杆菌红色荧光质粒

质粒大小：6052bp

启动子：T7 promoter

复制子：pBR322 ori

终止子：T7 terminator

质粒标签：N-6×His, N-Thrombin, N-mCherry, C-6×His

荧光标记：红色荧光（mCherry）

原核抗性：Kan+

克隆菌株：DH5a

培养温度：37℃

表达宿主：BL21(DE3)等大肠杆菌

诱导方式：IPTG或乳糖及其类似物

5'测序引物：T7（5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'）

3'测序引物：T7-ter（5'-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'）

pET28a-mCherry质粒是一种原核表达载体，C端含有一个6×His标签，N端含有6×His标签、thrombin酶切位点、mCherry标签。该质粒含有多个常用的酶切位点，便于外源基因克隆。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导，目的基因被克隆到质粒载体上，受噬菌体强转录及翻译信号控制。

pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能系统，也是现今原核表达方面使用最广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下，可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。