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荧光实时定量PCR完全攻略-多功能混匀仪技术文章

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2007-04-08
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1,什么是定量PCR < / span> span>

在标准参考中,PCR分析的ZZ产物或监测PCR过程中,实现目标基因样本数量评估的样品评估,称为定量PCR。定量PCR定量一般可行性是在PCR扩增的指数阶段进行的。

2,定量PCR定量理论基于什么

是特异性的扩增的基因片段的初始含量越大,时间越短当扩增速率稳定时,无论原始样品中的初始模板含量如何,ZZ扩增片段的含量通常是相同的。理想的扩增结果:Y = X×2n,其中Y代表扩增产物的数量,X代表PCR反应体中原始模板的数量,n代表扩增的数量;从理论上讲,PCR扩增效率为100%,PCR产物随循环而变化。NA的进程呈指数增长,但实际上每个NA副本都不完整,也就是说,每次扩增中模板都不会增加2倍。 ;实际值应为:Y = X(1 + E)n,其中E表示扩增效率:E =涉及复制的模板/总模板,通常E≤1,在整个PCR扩增过程中E都不固定。通常X在1到105个副本之间,当循环数n≤30时,E相对稳定,原始模板以相对固定的指数形式增加,这适合于定量分析,即所谓的指数阶段。随着循环次数n的增加(> 30次),E值逐渐减小,Y以非固定的指数形式增加,*进入平台期后。