1.光度噪声对分析和测试误差的影响
在光度分析中,尤其是在紫外线和可见光在分析中,光度噪声(Photomet ricNoise)是影响比尔定律偏差的主要因素之一,并且是分析误差的主要来源。如果已知光度噪声为N,则可以使用AJ Owen提出的计算公式:噪声误差(%)= N×100 / A,如果N不同,则吸光度的相对误差ΔA/ A( ΔA为吸光度* *误差,A为吸光度的真值)或在A不同的情况下找到ΔA/ A与N的关系。
目前,一些仪器制造商和用户国内外都没有注意仪器光度噪声对分析和测试结果的影响。一些制造商甚至没有给出样品光度噪声的重要指标。一些制造商(技术人员)在测试光度噪声时只能测量15分钟或30分钟。这些是不正确的,是值得注意的重要问题。
UV-Vis分光光度计的光度噪声是分析误差的主要来源之一,其主要影响或局限性是被测样品浓度的下限。目前,世界上的紫外可见分光光度计的光度噪声为±0。 0002Abs(峰到峰值,例如美国瓦里安的Cary5)。当其下限为0.02Abs时,测量误差可达到1%。国外有很多UV-Vis分光光度计,其光度噪声在±0以内。 0002Ab s(峰到峰值,例如美国P-E Corporation的Lambda900)。这些紫外-可见分光光度计具有非常低的光度噪声,在海洋生物学和生命科学的研究工作或小样品分析中具有重要的实用价值。当前的家用紫外可见分光光度计具有较大的光度噪声。仅少数仪器具有极低的光度学噪声,例如北京钱包总公司的TU-1901,其光度学噪声为±0.0004Abs(峰间值)。当噪声极限的测量下限为0.04Abs时,由噪声引起的测量误差可达到1%。因此,我国的紫外可见分光光度计的制造商必须做出巨大的努力以减少仪器的光度学噪声。
当前,国内外许多制造商都没有在样品中给出仪器的光度学噪声,这是不合适的。因为在没有给出仪器的光度噪声的情况下,用户无法判断该仪器是否适合低浓度使用,以及其灵敏度和准确性是否可以满足使用要求。很难判断仪器的适用性和可靠性,这会给用户带来很大的麻烦。因此,无论是低品位的紫外可见分光光度计还是**紫外可见分光光度计,它都应该为用户提供极其重要的光度噪声关键技术指标。紫外可见分光光度计的光度噪声与扫描速度密切相关。一般来说,扫描速度快的紫外可见分光光度计的噪声必须很大。相反,如果紫外可见分光光度计的噪声很小,则其扫描速度不会太快。因此,目前,世界上许多紫外可见分光光度计的制造商在设计时都考虑了扫描速度与光度噪声之间的关系,不会使扫描速度非常快,反而使光度噪声非常大。 。相反,它们不会使光度学噪声变得很小,但是会使扫描速度非常慢。但是目前,一些国外制造商确实使他们的紫外可见分光光度计的扫描速度非常快,而忽略了光度学噪声。错了因为通常来说,UV-Vis分光光度计的扫描速度不如光度学噪声重要。至少扫描速度对分析和测试错误没有影响。噪声是分析误差的主要来源之一。
第二,光度噪声的表达方法
光度噪声是一种超越时间输出信号改变,但是是随机的。它是紫外可见分光光度计分析误差的主要来源之一,它直接影响仪器的信噪比和检测极限。目前,世界上有两种表达光度噪声的方法:一种是以吸光度(Abs)表示。另一种是用透光率(%T)表示。日本和我国的UV-Vis分光光度计制造商使用透射率(%T)较多,而欧美和其他国家/地区的UV-Vis分光光度计制造商使用吸收率(Abs)更多。应该说两者都可以使用。 。但是使用吸光度(Abs)。这是因为当大多数用户使用UV-Vis分光光度计时,他们基本上是使用吸收率而不是透射率。如果仪器的光度噪声以透射率(%T)表示,则在计算误差时,必须将透射率转换为吸收率,这会对用户造成不必要的麻烦。
3.光度噪声的测试方法
UV-Vis分光光度计光度噪声,当前国际测试方法是:仪器在冷态下开启,预热0.5h后,样品和参比池均为空气,吸光度设为0Abs,光谱带宽为2nm,波长为500nm。将仪器从长波切换到短波,并进行1小时的时间扫描。 1h内,取10min内的任意10min数据,取10min内的ZD峰峰值作为500nm处的噪声。
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