血清制备的有关内容

血清 制备的有关内容

恒温水浴锅、溶氧控制器和积分仪组成，当一定的试液注入样品混合器后，与流速为 1．5ml ／min 的 0．02mol／L 磷酸缓冲液(PH8．5)混合，一起经热交换器恒温(32±0．1)℃ ，再进 入反应室在固定化酶催化下进行氧化反应，使反应液中溶解氧浓度下降，这样，氧电极就产 生差异电流响应峰，由积分仪记录下来，当溶液中的尿酸经载流液洗脱离开酶反应后，电极 很快回到起始状态，信号随即回到基线，就可以进行第二次注射分析。 3 伏安法 伏安法是目前常用的检测尿酸的方法， 近年来， 伏安法检测尿酸在理论研究和实际运用 于临床诊断上都取得了很大的发展。伏安法检测尿酸常用的方法有以下几种： 3．1 微电极差示脉冲伏安法 在电极表面修饰一层化学物质分子， 赋予电极以特定的性质， 能有效地降低某些氧化原 物质的过电位，从而达到分离或同时测定的目的。

目前，微电极差示脉冲伏安法常用的是聚 甘氨酸修饰碳纤维微电极差示脉冲伏安法，利用碳纤维微电极(CFME)经过特定的电化学方 法活化 l 0l，活化后的 CFME 表面修饰一层聚甘氨酸膜，该膜电极对尿酸有近可逆的响应， 借助于差示脉冲伏安法(DPV)技术，它检测尿酸的灵敏度达 2x10 mol／L，检测线性范围为 3．3 x 10～～8．0x 10 mol／L(t=70s)。该方法测定结果准确，可望用于在线检测，但应用 不是十分广泛。

3．2 吸附溶出伏安法 吸附溶出伏安法是一种高灵敏度，有一定选择性的电分析方法。它是在 Britton— Robinson 缓冲体系中(PH7．50)，研究尿酸的吸附溶出伏安行为，是测定尿酸的新方法。其 实验方法是在电解池中加入 Britton—Robinson 缓冲液(PH7．50)和适量的尿酸溶液，定溶后 通氮气除氧气 5min，插入三电极系统，选择合适的富集时间，在+0．10～一 0．80 V 范围 内用 SV 一 1 型溶出伏安仪记录其伏安曲线，这是一种新的测定尿酸的方法，可用于尿酸及 血浆中的尿酸分析。此方法的线性范围为 2．0 X 10 一。～1．0 X10—5 ／L，检出限量为 1．0×10—8 mol／L[ ，该法抗干扰能力强，操作简便，样品处理简单，易于推广。

4 GX液相色谱法 该方法是较常用， 较基本的尿酸检测方法， 所用流动相简单， 分离效果较好， 操作简便、 快速。它的操作主要要注意以下几点：1．标准对照品及样品的制备与全处理：1)标准对照 品制备：将尿酸用 11．0mmol／L 的混合标准溶液 sl，将 sl 倍比稀释 5 次至 。2)样本收集： 收集受试者 24h 尿液，用甲苯防腐，准确记录尿量，混匀后取约 5ml，同时取静脉血 3ml， 及时分离血清，与尿液一起置于一 20℃下，于一周内分析。3)准确吸取系列混合标准液， 血清及 40 倍稀释的尿液 0．1ml，滴加 1．9ml 甲醇在漩涡振荡器上混匀，于 60~r／min 离 心 10min，取上清液 1．2ml 置于干净试管中，在氮气流下吹干，分析前以流动相 0．3ml 复溶，漩混 lmin，自动进样 40ul 进行色谱分析。

2．色谱条件：分析柱：Shim—pack CLC 一 0D6 15crI 广_0．6ern 预柱 Shim—packCLC G—ODS(4)；流动相 0．02mol／L KH2 PO4。 3．用磷酸调 PH 3．2；流速 lml／min，柱温 35℃ AUFS 0、001；波长 233nm 5 磷钨酸还原法 磷钨酸还原法是目前临床比较常用的方法， 利用无蛋白滤液中的尿酸在碱性环境中可被 磷钨酸氧化成尿囊素及二氧化碳，磷钨酸被还原成钨蓝(tungsten blue)，根据钨蓝颜色深浅， 用 710nm 波长滤光板或红色滤片，与同样处理的标准比较，进行比色，以空白调零点，可 求出其浓度值。

                                                             血清制备的有关内容

恒温水浴锅、溶氧控制器和积分仪组成，当一定的试液注入样品混合器后，与流速为 1．5ml ／min 的 0．02mol／L 磷酸缓冲液(PH8．5)混合，一起经热交换器恒温(32±0．1)℃ ，再进 入反应室在固定化酶催化下进行氧化反应，使反应液中溶解氧浓度下降，这样，氧电极就产 生差异电流响应峰，由积分仪记录下来，当溶液中的尿酸经载流液洗脱离开酶反应后，电极 很快回到起始状态，信号随即回到基线，就可以进行第二次注射分析。 3 伏安法 伏安法是目前常用的检测尿酸的方法， 近年来， 伏安法检测尿酸在理论研究和实际运用 于临床诊断上都取得了很大的发展。伏安法检测尿酸常用的方法有以下几种： 3．1 微电极差示脉冲伏安法 在电极表面修饰一层化学物质分子， 赋予电极以特定的性质， 能有效地降低某些氧化原 物质的过电位，从而达到分离或同时测定的目的。

目前，微电极差示脉冲伏安法常用的是聚 甘氨酸修饰碳纤维微电极差示脉冲伏安法，利用碳纤维微电极(CFME)经过特定的电化学方 法活化 l 0l，活化后的 CFME 表面修饰一层聚甘氨酸膜，该膜电极对尿酸有近可逆的响应， 借助于差示脉冲伏安法(DPV)技术，它检测尿酸的灵敏度达 2x10 mol／L，检测线性范围为 3．3 x 10～～8．0x 10 mol／L(t=70s)。该方法测定结果准确，可望用于在线检测，但应用 不是十分广泛。

3．2 吸附溶出伏安法 吸附溶出伏安法是一种高灵敏度，有一定选择性的电分析方法。它是在 Britton— Robinson 缓冲体系中(PH7．50)，研究尿酸的吸附溶出伏安行为，是测定尿酸的新方法。其 实验方法是在电解池中加入 Britton—Robinson 缓冲液(PH7．50)和适量的尿酸溶液，定溶后 通氮气除氧气 5min，插入三电极系统，选择合适的富集时间，在+0．10～一 0．80 V 范围 内用 SV 一 1 型溶出伏安仪记录其伏安曲线，这是一种新的测定尿酸的方法，可用于尿酸及 血浆中的尿酸分析。此方法的线性范围为 2．0 X 10 一。～1．0 X10—5 ／L，检出限量为 1．0×10—8 mol／L[ ，该法抗干扰能力强，操作简便，样品处理简单，易于推广。 

4 GX液相色谱法 该方法是较常用， 较基本的尿酸检测方法， 所用流动相简单， 分离效果较好， 操作简便、 快速。它的操作主要要注意以下几点：1．标准对照品及样品的制备与全处理：1)标准对照 品制备：将尿酸用 11．0mmol／L 的混合标准溶液 sl，将 sl 倍比稀释 5 次至 。2)样本收集： 收集受试者 24h 尿液，用甲苯防腐，准确记录尿量，混匀后取约 5ml，同时取静脉血 3ml， 及时分离血清，与尿液一起置于一 20℃下，于一周内分析。3)准确吸取系列混合标准液， 血清及 40 倍稀释的尿液 0．1ml，滴加 1．9ml 甲醇在漩涡振荡器上混匀，于 60~r／min 离 心 10min，取上清液 1．2ml 置于干净试管中，在氮气流下吹干，分析前以流动相 0．3ml 复溶，漩混 lmin，自动进样 40ul 进行色谱分析。

2．色谱条件：分析柱：Shim—pack CLC 一 0D6 15crI 广_0．6ern 预柱 Shim—packCLC G—ODS(4)；流动相 0．02mol／L KH2 PO4。 3．用磷酸调 PH 3．2；流速 lml／min，柱温 35℃ AUFS 0、001；波长 233nm 5 磷钨酸还原法 磷钨酸还原法是目前临床比较常用的方法， 利用无蛋白滤液中的尿酸在碱性环境中可被 磷钨酸氧化成尿囊素及二氧化碳，磷钨酸被还原成钨蓝(tungsten blue)，根据钨蓝颜色深浅， 用 710nm 波长滤光板或红色滤片，与同样处理的标准比较，进行比色，以空白调零点，可 求出其浓度值。