气相色谱法测定午餐肉中的有机氯农药

　　一、目的与要求：

　　1、掌握有机氯农药残留量的测定方法

　　2、初步掌握气相色谱仪'>气相色谱仪的使用方法。

　　二、原理：

　　气相色谱法是一种比较新型的物理分离的分析方法，其作用原理是当样品组分经气化呈气态的载气的携带下，通过填满固定相的色谱柱时，由于样品组分在气-液(或气-固)两相中的分配(或吸附)系数的不同而得到分离。在柱后接上检测器，显示色谱峰，与有机氯农药标准溶液比较即可定性和定量地测得样品的组成成分。

　　三、试剂与仪器：

　　1、试剂

　　(1)丙酮重蒸

　　(2)石油醚60-90℃经全玻璃系统蒸馏器重蒸至色谱图无异常.

　　(3)无水硫酸钠(AB)，550℃灼烧4小时。

　　(4)内标溶液，以环氧七氯为内标：称环氧七氯0.0100克以上，用少许丙酮溶解，用石油醚定容至100毫升。

　　(5)农药的标准溶液：

　　λ分另Jj称取2-666，β-666，γ-666，δ-666，PP`-DDE，0P，-DDT，PP`-DDD，PP-DDT标准样品

　　各0.01克用少量丙酮溶解后，以石油醚定容100毫升，(100ug/ml)称A液。

　　B、精密吸取2-666，γ-666，A溶液5毫升，δ-666A溶液10毫升，

　　β-666，PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PP-DDTA溶液各25毫升，置于1000毫升容量瓶中，用石油醚定容为B液，δ-666，γ-666，B液浓度为(0.5ug/ml)，6-666B液浓度为(1ug/ml)，β-666，PP`-DDE，0P`-DDT，PP-DDD`，PP-DDT`浓度为(2.5ug/ml)，

　　c、配制几种不同浓度应用的标准C液。

　　分别取8种B液各16毫升，14毫升，12毫升，10毫升，8毫升置5个100毫升容量瓶内，分别加100微升环氧七氯后用石油醚定容到100毫升为C液。

　　2、仪器

　　气相比色谱仪，电子捕获检定器。

　　色谱柱长1.2米，内径3毫米螺旋形不锈钢柱固定液用OV-173%及QF15%混合液。

　　柱体Chromosorbw 80-100目

　　柱温190℃，载气高纯N2

　　检测温度210℃，载气流40ml/分

　　汽化温度210℃。

　　四、高脂样品的提取：

　　(1)消化：

　　称取均样10克于200毫升园底瓶中，加入35毫升高氯酸冰醋酸(1：1)混酸于90℃水浴上加热(加热时要不停地振摇以免结成炭粒)，直到样品完全溶解为止，溶液呈紫红色液体，冷却，加水35毫升(水：酸=1：1)，如溶液发热仍需冷却。

　　(2)抽提：

　　用(bp60-90℃)石油醚，以40，30，30毫升萃取3次，合并萃取液，通过无水硫酸钠柱子，抽提液全量为100。

　　(3)净化：

　　将l00毫升石油醚抽提倒入250毫升分液漏半中，加10毫升浓硫酸(酸：石油醚=1：l0)，轻轻振摇，静置分层(放置过夜)，然后放掉下层酸液，重复1-2次，加2%硫酸钠40，30，30毫升洗至中性，加入无水硫酸钠5克，定容至l00毫升，并加入内标环氧七氯lOml，进入气相色谱仪进行测定。

　　(4)测定

　　a、将配制的各种浓度标准c液进入色谱仪得到各种浓度的标准色谱图山峰顺序为α-666，β-666，γ-666，δ-666，环氧七氯PP`-DDE，0P-DDT，PP`-DDD，PPl-DDT，并量其峰高值。

　　b、取净化液适量(一般在0.2UL-lOul之间，使其响应值在检测器线性范围内)注入气相置谱仪内，并选取与样品峰高相近的标准农药峰高代入下式。

　　计算：

　　农药残留含量PPm。

　　按下式用内标校正。

　　残留量：

　　PPM=(H/H2) × (C/W) X (HO/HO`) X (WO/CO`)

　　H/H`：样品中该组分的峰高和标准液中该组分峰高。

　　HO/HO：标样中内标的峰高和试样中内标的峰高。 ·

　　C/W：注入到色谱仪中的标准液所含该组分的浓度(ug/m1)和样品的重量。

　　WO/CO,：样品W中所加人的内标重量(ug)和标准液中所含的内标浓度(ug/ml)。