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单细胞流式分选原理和应用

单细胞分选

流式单细胞分选是对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。


细胞分选的原理

往样品管中放入胞悬液,经过高压的作用进入流动室内。鞘液充满了流动室,细胞被排成单列,以一定速度,在鞘液的包裹和推动下从流动室喷口喷出。有一个超高频的压电晶体配在流动室的喷口,充电后振动,将喷出的液流断裂为均匀的液滴,在这些液滴之中分散着待测细胞。将正、负不同的电荷充入这些液滴,当液滴往带有几千伏的偏转板流经时,高压电场会使充电液滴发生偏转,向着各自的收集容器落入,而中间的废液容器中则落入没有充电的液滴,从而使细胞的分离得以实现。


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流式细胞分选能够以射光的荧光强度和波长为依据分开发光颗粒亚群,从而使单克隆分选实现。可以鉴定、分类、定量和分离复杂样本中的细胞,单次能够同时进行其中一种到四种特定细胞的高速分选纯化、高通量单克隆分选或细胞芯片制备。在培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等方面能够直接对分选后的细胞进行使用。能够对细胞基因、蛋白、功能水平以及不同细胞之间的差异化进一步进行研究。硬件中样本细胞只有小于5%的比例,使样本中目标细胞的高回收率得以保证。


应用

细胞结构、活性和功能会受到生物材料的影响。高纯度、高活性的稀有细胞能够通过仪器的分选功能分选得到,能够通过通过直接培养、诱导、增殖、分化、活化和移植等对细胞功能和细胞ZL进行更深一步的探索,还能够基于此对基因组合蛋白质进行逆向研究,对致病基因、致病蛋白和疾病信号传导方式进行寻找。


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