离心机在细胞培养及外源基因中的应用
以分析其表达,测定表达对细胞生长的影响,或将高表达的基因产物纯化将外源DNA导入哺乳动物细胞有两种途径:稳定()或暂时性转染稳定转染的目的是将转移基因整合到细胞染色体DNA上,形成稳定表达转移基因的细胞系一般需要共转染一个选择标记,用于追踪转染成功的细胞或转染效率暂时性转染的目的是为了分析转移基因的暂时转录或表达,一般在转染后1-4天内进行针对培养细胞的外源DNA导入已发展出多种技术,其中常用的有磷酸钙介导的转染,DEAE-葡聚糖介导的转染,脂质体介导的转染,电穿孔法等这4种方法除DEAE-葡聚糖法外,均可用于暂时性转染和性转染但它们有各自适用的细胞系培养的细胞不同,其在摄取和表达外源DNA的能力上可能存在几个数量级的差异因此针对细胞系优化并比较几种不同方法的效率很重要 湖南湘仪DD-5M落地式低速离心机
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