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仪器网/ 应用方案/ 聚乙二醇-聚乙烯亚胺介导小干扰RNA体外转染神经干细胞的

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作者:梁嫣然 刘中霖 毕伟 帅心涛 王伟伟 陶恩祥 510120 广州,中山大学孙逸仙纪念医院神经内科(梁嫣然刘中霖陶恩祥);510275 广州,中山大学化学与化学工程学院(帅心涛王伟伟);510630 广州,暨南大学附属**医院神经内科(毕伟) 摘要:目的 研究聚乙二醇-聚乙烯亚胺(PEG-PEI)作为非病毒纳米载体介导小干扰RNA(siRNA) 体外转染C17.2 NSCs的效果 方法 采用自行设计合成的PEG-PEI与靶向Nogo 受体复合体基因的siRNA 形成复合物,通过粒径与电位的测定凝胶阻滞电泳实验等方法观察PEG-PEI/siRNA纳米复合物的表征及复合效果以脂质体复合体系Lipofectamine 2000/siRNA 为对照,采用流式细胞仪检测不同N/P 比(PEG-PEI 中氮原子和siRNA 中磷原子的摩尔比)的PEG-PEI/siRNA复合物对NSCs的转染效率 结果 PEG-PEI和siRNA形成粒径为纳米级别的复合物袁随着N/P比增大,复合物的粒径逐渐减小,而表面电位逐渐增大凝胶阻滞电泳实验表明siRNA 与PEG-PEI可以通过静电相互作用而稳定结合流式细胞仪检测细胞转染率后发现,N/P=15时,PEG-PEI/siRNA复合物转染率Z高,可达(78.72依8.18)% 结论 PEG-PEI 是一种有良好发展前景的非病毒型siRNA 转运载体,对神经干细胞基因ZL具有潜在的应用价值 关键词:神经干细胞;转染;共聚物;载体

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