热点应用丨SCION（赛里安）LC6000高效液相色谱仪对阿斯巴甜和阿力甜的测定

前言

2023年7月14日，国际癌症研究机构（IARC）、世界卫生组织（WHO）和粮食及农业组织（FAO）食品添加剂联合专家委员会（JECFA）联合发布了无糖甜味剂阿斯巴甜对健康影响的评估报告。国际癌症研究机构（IARC）援引对人类致癌性的“有限证据”，将阿斯巴甜归为 可能对人类致癌之列（IARC 2B组），食品添加剂联合专家委员会（JECFA）重申，阿斯巴甜每日允许摄入量为40mg/kg。

国际食品法典委员会（CAC）批准阿斯巴甜可用于冷冻饮品、口香糖、糖果、焙烤食品、水产品、调味品、碳酸饮料等，规定Z 大使用量为0.3g/kg~10.0g/kg。我国通过食品安全国家标准对阿斯巴甜的使用范围、Z 大使用量等进行严格规范管理。

本文搭配了SCION（赛里安） LC6000 6430超高灵敏度二极管阵列检测器，采用先进的光路设计，结合小体积流通池和单色器可变狭缝，阿斯巴甜和阿力甜检出限可达1.0mg/kg。

实验部分

仪器

采用包含以下模块的SCION（赛里安）LC6000高效液相色谱仪系统：

集成六通道真空脱气的SCION LC6100 四元泵

 SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器

 SCION LC6320 立式柱温箱

 SCION LC6430 DAD 超高灵敏二极管阵列检测器

 液相色谱条件

▼ 表1 方法参数

试剂及标准品

乙腈溶液(HPLC级)、 阿力甜标准品（编号：BWJ4683-2016）、阿斯巴甜标准品（编号：ASP:841418）

结果

示例图谱

▲ 图1 阿斯巴甜和阿力甜 25μg/ml示例色谱图

▲ 图2 阿斯巴甜和阿力甜3D紫外吸收全谱图（190nm-230nm）

标准曲线

将阿斯巴甜和阿力甜混合标准溶液依次稀释为5、10、25、50、100μg/ml，使用外标法进行标准定量，以浓度为横坐标峰面积为纵坐标作外标工作曲线；阿斯巴甜和阿力甜响应值与浓度呈良好的线性关系，所得到的相关系数在0.9999以上，详见图3。

▲ 图3 阿斯巴甜和阿力甜标准曲线

样品

称取5g的无糖可乐,在50°C水浴上除去二氧化碳，并用水稀释10倍，然后使用0.45μm滤膜进行过滤，从而制备所需的分析无糖可乐，实验结果可见阿斯巴甜分离良好，含量为14.1μg/ml与市面上无糖可乐添加量基本一致，符合CAC食品添加剂相关规定。详见图4。

▲ 图4 无糖可乐阿斯巴甜色谱图

重现性

阿斯巴甜峰面积RSD%0.71（n=6），保留时间RSD%0.10（n=6）；阿力甜标峰面积RSD%0.56（n=6），保留时间RSD%0.14（n=6）结果见表2。

▼ 表2 阿斯巴甜和阿力甜定量定性

检出限

国家标准 GB 5009.265-2016 阿斯巴甜和阿力甜检出限为1.0mg/kg，实验结果可见SCION LC6430 DAD二极管阵列检测器对阿斯巴甜和阿力甜检出限远优于国家标准GB 5009.265-2016，详见图5。

▲ 图5 阿斯巴甜和阿力甜1.0mg/kg检出限

结论

本应用搭配了SCION LC6000 6430二极管阵列检测器用来快速分析食品中的阿斯巴甜和阿力甜的方法，该方法配置合理、线性良好、灵敏度高，远优于国家标准GB 5009.265-2016食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定方法。