【热点应用】动物源食品中硝基呋喃的检测工作流程

硝基呋喃类药物是一种人工合成的广谱抗生素，主要包括呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林和呋喃妥因等，曾广泛应用于畜禽及水产养殖业。但研究发现呋喃西林、呋喃唑酮及其代谢物 3-氨基-2-恶唑酮（AOZ）等具有致癌作用。

欧盟已于 1995 年禁止在食用动物中使用硝基呋喃类药物，我国也于 2002 年颁布了禁止使用该类兽药的禁令。2022 年 10 月 27 日，海关总署紧急下达了输欧盟动物源性食品执行新残留限值标准，硝基呋喃代谢物检测增加了硝呋索尔代谢物，总共 5 种代谢物的测定限为 0.5 μg/kg。硝呋索尔和其他硝基呋喃类药物类似，其本体和代谢物均具有很强的生物毒性，但母体易在动物组织中快速降解，同时代谢物易与蛋白结合，形成稳定的结合态残留物，因此通常将代谢物作为硝基呋喃类药物残留的标示物来反映其用药情况。目前检测标准均未同时覆盖所有 5 种硝基呋喃类代谢物。

样品前处理流程

图 1. 猪肉和猪肝样品 5 种硝基呋喃类代谢物前处理操作流程

液相色谱条件

质谱条件

表 1. 5 种硝基呋喃代谢物 MRM 参数

注：*为定量离子

Captiva EMR-Lipid 脂肪去除效果

使用盐酸溶液水解后，猪肉和猪肝中含有的较多脂肪也会游离出来， Captiva EMR-Lipid 是安捷伦专有卓效去除脂质的通过式净化的产品，图 2 显示了 Captiva EMR-Lipid 净化前后，采用 184+ 母离子扫描方式对样品进行磷脂残留监测，从图中明显可以看出相比于未净化，Captiva EMR-Lipid 净化后样品基质中绝大多数的磷脂干扰物都可以得到有效去除，由此可获得更干净更彻底的净化效果，从而能够更好的保护色谱柱和仪器。

图 2. Captiva EMR-Lipid 方法（绿色）净化与未净化（红色）相比的脂质残留监测对比

图 3. 5 种硝基呋喃类代谢物外标与内标的叠加 MRM 谱图

检测限和定量限

通过空白基质加标回收实验来确定方法的检测限和定量限。当加标浓度为 0.5 µg/kg 时，5 种化合物均可定性检测，且目标化合物峰的信噪比（S/N）均大于 3，由此确定该方法的检测限为 0.5 µg/kg；当加标浓度为 1 µg/kg 时，S/N 均大于 10，且回收率和重复性均能满足相关国家标准要求，由此确定该方法的定量限为 1 μg/kg。

加标回收率和精密度

本文选择了两种动物源基质（猪肉、猪肝），并在 1、2、10 μg/kg 三个浓度水平下做加标回收试验，每个水平做 6 个平行，结果列于表 2 中。从表中可以看出，各目标化合物的平均加标回收率和相对标准偏差分别在 77.4%–111.0% 和 4.3%-14.6% 之间，均能满足相关国家标准要求，表明本文所开发的方法具有良好的准确度和精密度。猪肉和猪肝空白和加标样品的 MRM 色谱图见图 3。

表 2. 5 种硝基呋喃代谢物在猪肉和猪肝中的加标回收率结果

产品订购信息