【 PSS | TN.221024 】《光阻法测定乳状注射液中大于5μm的乳粒》药典解读

摘要：乳状注射液中尾部大颗粒的含量对于其质量安全性有重要影响，本文围绕着中国药典《光阻法测定乳状注射液中大于5μm的乳粒》一章节，以奥法美嘉公司的Accusizer A7000 APS设备为例，探究了光阻法的工作原理及其测量规范要求：粒径及浓度的准确性和重复性，并对乳状注射液中大于5μm的乳粒做了相应的规范要求，为国内脂肪乳的研发与生产提供参考。

关键词：光阻法、乳状注射液、5μm、尾部大颗粒、Accusizer A7000 APS

背景介绍

乳状注射液又称脂肪乳注射液，是水包油的分散体系, 外观呈半透明或不透明的乳状液体, 为热力学不稳定体系。其制备工艺一般采用高压均质法或微射流法, 无论采用哪种制备方法, 脂肪乳的粒径都无法得到完全均一的值, 存在一定粒径分布范围。

通常, 在脂肪乳中,当油脂的密度低于周围水媒介密度约10%时, 乳析现象就会产生。乳析的乳剂只要轻轻搅拌, 乳滴仍能重新分布。但当脂滴合并成直径超过1μm的大脂滴时, 脂滴的合并便是不可逆的过程, 脂滴会逐渐聚集, 1μm脂滴可“生长”成 5μm甚至更大的脂滴颗粒, 直至自由脂滴从乳剂中析出，成为不稳定脂肪乳。

当直径大于5μm的乳滴占脂肪乳油相体积的百分比 (volume weighted percent of fat greater than five micrometers, PFAT5) 超过0.05%时, 会影响脂肪乳的稳定性, 临床上产生有效性隐患和安全性风险，也就是说, 脂肪乳的 PFAT5 的值会直接影响脂肪乳的质量。因此, 在尾部大颗粒控制中, 通常选择5μm作为尾部大颗粒测定的阈值。

工作原理

乳状注射液中5μm以上大乳粒的比例，可采用基于光阻（光消减）原理的单粒子光学传感技术进行测定。单个粒子通过狭窄的光感区时阻挡了一部分入射光，引起到达检测器的入射光强度瞬间降低，强度信号的衰减幅度理论上与粒子横截面（假设横截面积小于光感区的宽度），即粒子直径的平方成比例。用系列标准粒子建立粒径与强度信号大小的校正曲线。仪器测得样品中乳粒通过光感区产生的信号，根据校正曲线计算出乳粒的粒径及加权体积。使用单粒子光学传感技术传感器时，需知道重合限与Z 佳流速。

验证标准（对仪器）

将仪器的阈值设为 1.8μm，上限为 50μm。分别测定5μm、10μm两种规格的标准粒子，每一种标准粒子检测三次，所测得的标准粒子的平均数均粒径的相对标准偏差应不大于10％，与其标示值的偏差应小于10％。此外，所测得的每毫升标准粒子的数目应在标准粒子标示浓度的±10％以内。

验证标准（对乳液）

如果仪器配有自动稀释系统，直接用注射器或聚四氟乙烯管线将高浓度的样品注入仪器中，由仪器自动稀释至适合的浓度再进行检测；如果仪器不具备自动稀释功能，则需手动稀释（第 一次至少稀释10倍），在预先经0.2μm 孔径过滤器过滤并经超声脱气的水中加入适量乳状注射液，缓慢搅拌得到轻微浑浊的均匀混悬液。无论哪种稀释方式，Z 终粒子浓度均应低于传感器的重合限。将检测器的阈值设为1.8μm，上限为50μm，测定样品，每个样品测定3次。按下式计算大于5μm的乳粒加权总体积占油相体积的百分比，其结果不得超过0.05%。

验证标准（对乳液）

奥法美嘉公司的Accusizer系列APS型号设备是一款典型的光阻法原理的设备，采用SPOS单颗粒光学传感技术，通过对样品进行自动稀释，有效避免了人工操作导致的检测误差，集检测、数据处理及自动冲洗等功能一体，操作便捷、高效。

按照上述药典要求，使用Accusizer A7000 APS光学粒度分析仪测试5μm和10μm的混合标粒（批号：UH13A），连续测试3次，结果如下图所示：

图1：第 一次测试

图2：第二次测试

图3：第三次测试

图4：标粒证书

如上图所示，5μm和10μm的粒径测试结果与证书标示值的偏差小于10%，且相对标准偏差与所测粒子浓度也小于10%，完全符合中国药典要求。

使用Accusizer A7000 APS测试乳状注射液，结果如下图所示：

检测过程中，仪器采用自动化设计，报告模板按照药典标准，可直接给出合格/失败的判定，给用户带来极大的方便。

参考资料

中国药典：光阻法测定乳状注射液中大于5μm的乳粒