解决方案

保留弱、分离度不佳、峰形差!挑战极性化合物分析,整体解决方案……

在高效液相色谱分析中,使用反相色谱柱可解决80%以上问题。而反相色谱柱中,使用Z多的是C18柱。


然而,色谱分析检测的时,总是会碰到极性大的样品,实在让人很头疼,一直是分析检测领域面临的挑战和难题,经常遇到检测灵敏度低、保留弱、分离度不理想、峰形不佳等问题。


如何解决极性化合物分离问题?常见的解决办法有哪些?


一般极性化合物


       对于一般极性的化合物使用C18即可解决,C18色谱柱我们平时使用Z广泛,操作简便,可提供的厂家、品牌Z多,选择范围也很大,同时色谱柱平衡迅速,也可兼容MS。对于一般极性化合物,检测工作者可轻松解决。关键选择一款分离度好,寿命长,性价比高的色谱柱即可。


Chromegabond WR C18(满足您Z具挑战分析需求)

品牌:PerkinElmer色谱柱(原ES Industries,2021年收购)



       此外,氨基柱色谱柱家族中Z灵活的色谱柱,虽然分类上是正相固定相,却可在正相、反相、离子交换或 HILIC 模式下使用。可用于极性化合物的正相分析,弱阴离子交换以及含水的反相液相分析。氨基柱被广泛应用于木糖、乳糖、葡萄糖等糖类的反相分析模式中。


Chromegabond Amine(NH2)(卓越、经久耐用的氨基色谱柱)

品牌:PerkinElmer色谱柱(原ES Industries,2021年收购)



CMB WR C18应用案例:西洋参中人参皂苷的测定

人参叶中两种人参皂苷(人参皂苷Rg1、人参皂苷Re)的分离检测的波长较低(203nm),且两种皂苷保留性差异不大,对色谱柱的分离性能是较大挑战。本实验按照中国药典2020版方法,使用CMB WR C18色谱柱对人参供试品中3种人参皂苷进行检测,主要难点在于Rg1和Re满足分离度要求,同时Rb1需要与相邻杂质有效分离。


结果表明在上述实验条件下,供试品中理论塔板数以人参皂苷Rg1计,理论塔板数66,468,远远大于药典要求(N>6000),与Re的分离度可达2以上,Rb1与基质中的相邻杂质也可以达到有效分离。

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中强极性化合物


       对于中强极性化合物,如果能在反相上保留,可选择亲水反相色谱柱,亲水反相色谱柱是在C18柱上键合或嵌合的极性基团,从而能够与极性化合物进行相互作用,从而增强对极性化合物的保留,另外,这类C18柱通常都能耐纯水相,减少流动相中有机相的比例,也能在另一方面增加极性化合物的保留。


Epic Polar (专为极性分析物保留而设计的高密度填料)

品牌:PerkinElmer色谱柱(原ES Industries,2021年收购)



应用案例:

使用Epic Polar (100 x 4.6 mm, 3 μm) 对儿茶酚胺及相关化合物进HPLC 分析。儿茶酚胺及相关化合物由于极性大,在极短时间(3 min)内出峰,容易出现分离度差,峰形不佳等问题。Epic Polar能实现儿茶酚胺及相关化合物的较好分离。

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强极性化合物


       对于强极性化合物在反相上无保留,正相上不溶解。这时可使用HILIC色谱柱,PerkinElmer色谱柱(原ES Industries,2021年收购)拥有各种HILIC模式的色谱柱,满足您各种HILIC分离的需求。


      许多市售 HILIC 固定相都是转化的正相色谱柱,导致方法不理想、分离能力较低且缺乏耐久性。我们的HILIC 色谱柱系列包括新款 Epic HILIC POH,专为 HILIC 色谱分析而设计,可以实现高性能分离,获得可靠方法, 并提供较长的色谱柱寿命。


Epic HILIC POH(新型HILIC固定相)


Epic HILIC RP(新型HILIC固定相)


Epic HILIC RP(HILIC 和反相色谱的新型固定相)


Epic HILIC PI(新型HILIC固定相)


Epic HILIC FL(新型HILIC固定相)


应用案例:

使用Epic HILIC RP (250 x 4.6 mm, 5 μm) 对苯二氮䓬类进行HPLC分析


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