应用分享︱FcR亲和色谱柱在抗体药物糖链结构分析及生产批次评估中的应用

单克隆抗体药物的质量控制具有很大挑战性，其原因之一是由于翻译后修饰产生的多样性。对IgG的Fc区域N-聚糖的监控，是确保抗体药物安全性和药效的重要条件之一。

本期推送中，小编分享两篇关于FcγRⅢa亲和色谱技术分析抗体药物糖链的Z 新研究文献。

文献一 
题目：

Non-targeted characterization of attributes affecting antibody-FcγRⅢa V158 (CD16a) binding via online affinity chromatography-mass spectrometry

文献内容要点：

通过质谱和各种色谱法对抗体药物Rituximab、糖链结构不同的抗体以及Fc融合蛋白中糖链结构的差异进行了分析。

文献中使用了AFC色谱柱TSKgel FcR-ⅢA-NPR进行在线质谱分析，使用TSKgel FcR-ⅢA-5PW进行半制备色谱样品收集，在研发初期阶段，作为与抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用 (ADCC) 有关的抗体分析，不仅有利于高通量分析，而且经济实惠。

分析流程图

文献链接：

https://doi.org/10.1080/19420862.2021.2004982

文献二 
题目：

Drifts in N-Linked Glycosylation Result in ADCC Potency Variation of Perjeta from August 2020 to October 2021 in China

文献内容要点：

针对抗体药物Pertuzumab (Perjeta®, 13批次抗体对照品) 的关键质量属性之一的ADCC，与抗体Fc片段的糖链结构之间的关系，使用了包括色谱法在内的各种分析方法进行了分析。结果表明，使用TSKgel FcR-ⅢA-NPR色谱柱分离的抗体峰Ⅰ的面积值，与抗体糖链的去岩藻糖和半乳糖比例之间，有着很强的负相关性 (下图) 。

可以看出，相比ADCC分析，在抗体生产的药品放行检验中增加对抗体的去岩藻糖比例 (afucose%) 的分析要更简便一些。

文献链接：

https://doi.org/10.1155/2022/7868391

总结

以重组FcγRⅢa为固定相的亲和色谱柱TSKgel FcR-ⅢA-NPR和TSKgel FcR-ⅢA-5PW无论在药物研发初期的糖链结构分析，还是在药品生产批次评价中都大有可为。