两种不同释放剂核酸提取法的新型冠状病毒RT-PCR内标检测结果比较

关键词:

新型冠状病毒；核酸提取；逆转录PCR；内标

引言：

新型冠状病毒（severeacuterespiratorysyndromecoronavirus2,SARS-CoV-2）引起的新型冠状病毒肺炎（coronavirusdisease,COVID-19）继续在全世界肆虐。WHO报道，截至2020年6月1日11：11am，全世界确诊病例6040609例，死亡病例230104例。对SARS-CoV-2进行核酸检测，是WHO目前推荐的识别感染病例的方法。李克强总理主持召开中yang应对新冠肺炎疫情工作领导小组会议提出：提高新冠病毒核酸检测能力，加快快速便捷检测试剂和设备研发生产，缩短检测时间，推进重dian人群“应检尽检”、其他人群“愿检尽检”，推动各地互通互认检测结果，促进精zhun防控、人员流动和全面复工复产。

深圳市宝安中医院（集团）检验科PCR实验室自2020年3月10日开始SARS-CoV-2的核酸检测工作，截至2020年5月11日，共检测19522份标本。采用中山大学达安生物有限公司生产的“新型冠状病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）”，试剂盒采用的内标（IC）为人类RNaseP基因（RP）。在实验工作中，经常出现内标扩增曲线不出现典型“S”型或者内标完全无扩增曲线的情况，导致重复检测，拖延了报告发放时间，给临床诊疗工作带来不便。本实验室在经过一系列实验之后，对达安公司试剂盒说明书中给出的实验方法进行了部分更改优化，经优化实验步骤后，内标的扩增曲线及起始循环Ct值均有明显改善，现具体报道如下。