解决方案

人参皂苷的检测方法(HPLC)

【概述】

人参皂苷(Ginsenoside)是一类固醇类化合物,又称三萜皂苷。主要存在于人参属药材中。人参皂苷被视为是人参中的活性成分,具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、 抗衰老等作用,因而成为研究的目标。本方法可用于检测人参、西洋参、花旗参等参类及其制品中的人参皂苷,方法简单,易于操作。


【实验/设备条件】

仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000

 色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)

 流动相:A:水   B:乙腈

 洗脱方式:梯度洗脱,见表1

 流速:1.0 mL/min

 柱温:35℃

 进样量:20 μL

 检测器:紫外检测器

 检测波长:203 nm


【样品提取】

称取1 g人参样品,加水50 mL,超声20 min,取出,离心后取上清液于另一干净试管,重复提取一遍,合并提取液,摇匀,取10 mL,待净化。

备注:加标样品为经预处理不含本底的空白样品。


【实验/操作方法】

活化:向大孔树脂净化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔树脂净化柱。

上样和洗脱:将待净化液的样品加入已经活化好的大孔树脂净化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔树脂净化柱,弃去淋洗液。用25 mL 70%甲醇水溶液洗脱大孔树脂净化柱,

,收集洗脱液,水浴蒸干,残渣以甲醇溶液定容,过PTFE滤膜,上机。

表1 梯度洗脱程序

时间/min

A/%

B/%

0.0

82

18

40.0

79

21

42.0

74

26

46.0

68

32

55.0

60

40

65.0

60

40

75.0

0

100

80.0

82

18

90.0

82

18


【实验结果/结论】

一、

(1)加标回收实验结果

表2 三种人参皂苷的加标回收结果

 

目标物

加标浓度 (mg/kg)

回收率(%)

平均回收率(%)

RSD(%,n=3)

RG1

500

89.34

87.03

85.74

87.37

2.09

RE

500

98.38

106.0

103.4

102.6

3.79

RB1

500

95.17

90.86

92.19

92.74

2.38

 

(2)三种人参皂苷色谱图

 图片1.png

 

图1 三种人参皂苷的色谱图


【仪器/耗材清单】


货号

描述

包装

COD101124000

Copure®D101大孔树脂净化柱,4g/12mL 

50支/盒

BN24

biocomma® 智能水浴氮吹仪

1台/箱

SF130-22-PTFE

PTFE针式过滤器,直径13 mm,孔径0.22 μm,有机系

100个/盒

SC2-1

2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425

100个/盒

V2-AL

2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425

100个/盒


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