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深圳逗点生物技术有限公司时间:
2022-02-15行业:
科研教学 材料科学【概述】
人参皂苷(Ginsenoside)是一类固醇类化合物,又称三萜皂苷。主要存在于人参属药材中。人参皂苷被视为是人参中的活性成分,具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、 抗衰老等作用,因而成为研究的目标。本方法可用于检测人参、西洋参、花旗参等参类及其制品中的人参皂苷,方法简单,易于操作。
【实验/设备条件】
仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000
色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)
流动相:A:水 B:乙腈
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:1.0 mL/min
柱温:35℃
进样量:20 μL
检测器:紫外检测器
检测波长:203 nm
【样品提取】
称取1 g人参样品,加水50 mL,超声20 min,取出,离心后取上清液于另一干净试管,重复提取一遍,合并提取液,摇匀,取10 mL,待净化。
备注:加标样品为经预处理不含本底的空白样品。
【实验/操作方法】
活化:向大孔树脂净化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔树脂净化柱。
上样和洗脱:将待净化液的样品加入已经活化好的大孔树脂净化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔树脂净化柱,弃去淋洗液。用25 mL 70%甲醇水溶液洗脱大孔树脂净化柱,
,收集洗脱液,水浴蒸干,残渣以甲醇溶液定容,过PTFE滤膜,上机。
表1 梯度洗脱程序
时间/min | A/% | B/% |
0.0 | 82 | 18 |
40.0 | 79 | 21 |
42.0 | 74 | 26 |
46.0 | 68 | 32 |
55.0 | 60 | 40 |
65.0 | 60 | 40 |
75.0 | 0 | 100 |
80.0 | 82 | 18 |
90.0 | 82 | 18 |
【实验结果/结论】
一、
(1)加标回收实验结果
表2 三种人参皂苷的加标回收结果
目标物 | 加标浓度 (mg/kg) | 回收率(%) | 平均回收率(%) | RSD(%,n=3) | ||
RG1 | 500 | 89.34 | 87.03 | 85.74 | 87.37 | 2.09 |
RE | 500 | 98.38 | 106.0 | 103.4 | 102.6 | 3.79 |
RB1 | 500 | 95.17 | 90.86 | 92.19 | 92.74 | 2.38 |
(2)三种人参皂苷色谱图
图1 三种人参皂苷的色谱图
【仪器/耗材清单】
货号 | 描述 | 包装 |
COD101124000 | Copure®D101大孔树脂净化柱,4g/12mL | 50支/盒 |
BN24 | biocomma® 智能水浴氮吹仪 | 1台/箱 |
SF130-22-PTFE | PTFE针式过滤器,直径13 mm,孔径0.22 μm,有机系 | 100个/盒 |
SC2-1 | 2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425 | 100个/盒 |
V2-AL | 2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425 | 100个/盒 |