猪肉中玉米赤霉烯酮检测的固相 萃取方法（Copure® HLB）

一、样品提取 

准确称取均质后的猪肉试样 5.00 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 离心管中加入 10 mL 0.05 M 乙酸钠缓冲液和 25 µL β- 葡萄糖 / 硫酸脂复合酶，混匀，于 37℃水浴中放置 12 h。水 解后加入 10 mL 乙腈，并加入 200 µL 1 M 的 NaOH 溶液，振 荡 30 min，4000 r/min 离心 3 min，移取上清液 10 mL，用 30  mL pH=7.4 的 PBS 溶液稀释，混匀，用滤纸过滤，收集于 50  mL 的离心管中备用。

 二、SPE 柱净化（Copure® HLB，150 mg/6 mL）

 活化：净化前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 的水平衡。 

上样和洗脱：取 10 mL 进行上样，将提取液以 2 mL/min 的 速度过柱，弃去滤液，依次用 5 mL 水，5 mL 甲醇淋洗，弃 去淋洗液，将小柱抽干，再用 10 mL 甲醇洗脱并收集洗脱液。 

重新溶解：40℃缓慢氮吹至近干，加 1 mL 乙腈溶解。涡旋混 合 1 min，过 0.22 µm 有机滤膜，待上机测试。 

三、仪器条件 

仪器：Waters Alliance 2695 色谱柱：InerSustain®-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2475 荧光检测器 检测波长：激发波长：274 nm 发射波长：440 nm 流动相：A：乙腈 B：水 C：甲醇 洗脱方式：等度洗脱，A：B：C=46：46：8 流速：1 mL/min 进样体积：20 µL 

四、实验结果 

表 1 0.24 mg/kg 猪肉基质中玉米赤霉烯酮的添加回收结果