银耳中米酵菌酸检测的固相萃取 方法（Copure® MAX）

一、样品提取 

干试样经粉碎过后称取 20.00 g（精确至 0.01 g）置于锥形 瓶中，加 100 mL 甲醇 / 氨水 / 水溶液 (80:1:19, v/v/v)； 鲜（湿）样试经剪碎、匀浆后称取 10.0 g（精确至 0.01 g）， 加入 80 mL 甲醇 / 氨水 / 水溶液溶液 (80:1:19, v/v/v)；混 匀，室温下避光浸泡 1 h，超声提取 30 min，过滤；干试样 滤液取 50 mL，鲜（湿）试样取滤液 40 mL，置 80℃水浴中（加 入沸石）浓缩至约 3 min，待净化。 

二、SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 

活化：MAX 固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 

上样和洗脱：在 MAX 固相萃取柱上加入待净化样品，弃去流 出液；用 5 mL 水、5 mL 甲醇淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱； 用 6 mL 2% 甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程 控制流速在 1 mL/min 以内）。 

重新溶解：洗脱液于 40℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用 1  mL 甲醇溶液溶解，经 0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。 

三、仪器条件 

设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器 ：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：267 nm 流动相：A：水（乙酸调 pH=2.5） B：甲醇 洗脱方式：等度洗脱，A：B=22：78 流速：1.0 mL/min 进样体积：20 µL

 四、实验结果 

表 1 1.0 mg/kg 银耳中米酵菌酸的添加回收结果