解决方案

猪肉中激素检测的固相萃取方法(Copure® HLB)

一、样品提取 

准确称取均质后的猪肉 5.0 g 于 50 mL 离心管中加入水 20 mL, 甲醇 5 mL,涡旋 1 min,4500 r/min离心 5 min,取上清液,备用。 

二、SPE 柱净化(Copure® HLB,60 mg/3 mL) 

活化:HLB 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱:往固相萃取柱中加入提取备用液,弃去流出液; 加入 3 mL 35% 甲醇水溶液淋洗,弃去淋洗液,抽干小柱;加 6 mL 甲醇洗脱,收集洗脱液(整个上样、洗脱过程保持流速 1  mL/min)。 

重新溶解:40℃缓慢氮气流条件下吹至近干,用 1 mL 甲醇 溶解,经 0.22 µm 滤膜重新过滤,供 HPLC 测定。 

三、仪器条件 

设备:Waters Alliance 2695 色谱柱:XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器:Waters 2487 紫外检测器;  检测波长:230 nm  流动相:A:乙腈   B:水;  洗脱方式:梯度洗脱 

表 1 梯度洗脱条件

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