水产品中氟苯尼考检测的固相萃 取方法（Copure® C18）

一、样品提取 

准确称取均质后的鱼肉 5.00 g（精确到 0.01 g），加入乙酸 乙酯 15 mL，高速均质 1 min，加入 3 g 无水硫酸钠，涡旋混 匀 1 min，摇床振荡 10 min。4000 r/min 转速离心 5 min。 将上清液转移至梨形瓶中，于 45℃旋蒸至近干，用 6 mL 水 溶解残渣，2×5 mL 次正己烷除脂，弃去正己烷层，待净化。 

二、SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 

活化：C18 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和 5 mL 水 活化，保持柱体湿润。 

上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以 2 mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用 5 mL 水淋洗固相萃取 柱，弃去淋洗液，抽干小柱。用 6 mL 甲醇洗脱固相萃取柱， 收集洗脱液。

重新溶解：洗脱液于 45℃氮吹吹干，用 1 mL 甲醇溶解，0.22µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。 

三、仪器条件 

设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：224 nm 流动相：A: 水 B: 乙腈 洗脱方式：等度洗脱，A：B=83：17 流速：1.0 mL/min 进样体积：20 µL 

四、实验结果 

表 2 添加水平为 1.0 mg/kg 鱼肉中氟苯尼考的添加回收结果