采用TSKgel G4000SWXL尺寸排阻色谱柱分离口蹄疫灭活疫苗146S抗原

概述

口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease, FMD）是一种感染牛、羊和猪等偶蹄动物的具有高度传染性的动物疫病。口蹄疫病毒培养物可以分离出不同密度的粒子，主要有四种：完全病毒粒子(146S)、空衣壳(75S)、12S蛋白质亚单位(12S)、病毒相关感染成分(VIA抗原4.5S)。146S抗原含量是决定口蹄疫疫苗质量和免疫效力的关键因素。

本篇应用是采用凝胶色谱柱TSKgel G4000SWXL对口蹄疫灭活疫苗146S抗原，进行GX尺寸排阻色谱 (HPSEC) 的分离检测。

01 样品的制备

口蹄疫灭活疫苗146S抗原参考方法^[1]制备。

02 分析条件

色谱柱：TSKgel G4000SWXL (7.8 mm I.D.×30 cm, 8 μm)

保护柱：TSKgel guardcolumnSWXL (6.0 mm I.D.×4 cm)

流动相：50 mM PB+0.1 mM Na₂SO₄（pH 7.2）

流速：0.6 mL/min

进样体积：100 μL

柱温：室温

检测器参数：UV @259 nm

03 分析结果

口蹄疫灭活病毒(O型)146S抗原纯化样品色谱图

04 结果与讨论

实验结果表明：使用凝胶色谱柱TSKgel G4000SWXL可对口蹄疫灭活病毒146S抗原进行GX分离检测，线性范围0.56-67.42 μg/mL，相关系数R²大于0.99（n=10）。

参考文献：

1. 徐嫄等. 应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量,生物工程学报,2018,34(5):676-684.