反相HPLC法同时测定人尿中茶碱及其两种代谢产物

色谱柱:Diamonsil C18, 150×4.6 mm, 5μm(Cat#:99601)

流动相:由1%甲酸: 乙腈( 95:5, V/V) 组成

柱温:40℃

流速:1.0 mL/min

检测器:紫外检测器 280 nm

摘要:目的: 建立一种同时测定人尿中茶碱及其1,3-二甲基尿酸( 1,3-DMU) 和3-甲基噻嗪( 3-MX)代谢产物的HPLC方法。方法:尿样用异丙醇/二氯甲烷( 2/8) 混合液提取, 有机相在空气吹干, 用流动相复溶后进行HPLC分析。色谱柱为Diamonsil ODS C18 5μm, 150 mm×4.6 mm I. D) , 流动相由0.1% 甲酸液和乙腈( 95:5 )组成,流速1.0 mL/min, 测定波长280nm。测定12 名受试者单剂量和多剂量口服茶碱后24h内尿中茶碱及其代谢物累计排泄量。结果:尿中茶碱及其代谢物1,3 DMU 和3-MX 的线性范围分别为0.312~40.0、0.156~ 20.0、0 .078~ 10.0 μg/mL, Zdi可定量浓度分别为0.312、0.156、0.078 μg/mL。批间和批内的变异小于15%, 回收率大于70%。结论: 该方法的特异性、灵敏度能够满足临床上对人尿中茶碱及其代谢产物同时测定的要求。