茶叶中草甘膦及其代谢物的测定 SPE-UPLC-MS/MS法-ProElut GLY+Polyamino HILIC

样品前处理：

1、标准品配制

单标标准储备液：准确称取各标准品，用水配制成1000 ug/mL的单标标准储备液。

混标标准中间液：分别吸取各单标标准储备液，用水配制成1.0 ug/mL、10 ug/mL和50 ug/mL的混标标准中间液。

2、提取

取1 g茶叶于50 mL离心管中，准确加入10 mL水、10 mL二氯甲烷，振荡10 min，超声10 min，8000 rpm离心5 min，取5 mL上清液，待净化。

3、净化

ProElut GLY 6mL (Cat#:65938）

(1)活化：	依次加入5 mL甲醇、5 mL水，弃去流出液；
(2)上样：	将待净化液加入柱中，弃去前3 mL流出液，收集后2 mL流出液，混匀，滤液过0.22 um尼龙滤膜，上机分析。

注：同方法制备基质匹配标准溶液。

色谱条件：

1 UPLC 条件：

色谱柱：Polyamino HILIC，150×2.0 mm，5 μm (Cat#：99302)

流速：0.2 mL/min 进样量：10 μL 柱温：35 ℃

流动相： A：乙腈 B：5 mM乙酸铵溶液，氨水调节至pH=11

梯度设置：

2.质谱条件：

电离模式：ESI 扫描方式：负离子扫描

检测方式：多反应监测电喷雾电压：-4500 V

雾化气压力：60 psi 辅助气压力：60 psi

气帘气压力：35 psi 离子源温度：550 ℃

定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表

摘要：: 草甘膦（Glyphosate，Gly）是广泛使用的一类广谱非选择性除草剂，以其GX、廉价等特性被运用于各个农业和非农业领域。其在环境和生物体中富集并通过食品进入人体，会对人体健康造成危害。随着其在茶叶上的广泛使用，草甘膦及其主要代谢产物氨甲基膦酸残留问题也越来越受关注。目前常用的检测方法为离子交换净化、七氟丁醇（HFB）和三氟乙酸酐（TFAA）衍生后GC-MS检测，或9－芴基甲基衍生后LC-MS/MS检测，这些方法通常存在操作时间长、需要衍生等问题，因此建立一种简便、快捷、有效的草甘膦及其代谢物残留的检测方法具有重要的意义。

迪马科技在参考各种标准及文献的基础上，建立了SPE-UPLC-MS/MS法测定茶叶中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸的检测方法，采用水提取， ProElut GLY固相萃取专用柱净化样品，收集流出液，Polyamino HILIC色谱柱分离检测。方法定量限0.1mg/kg。该方法特点：1）前处理步骤少，提取液直接通过净化柱接收流出液即可；2）有机溶剂消耗量小，前处理过程中也无需使用酸碱试剂；3）仪器分析简单，样品无需衍生直接分析可提高结果稳定性及减少实验成本。本方法适用于绿茶、花茶、铁观音、红茶和普洱茶中氨甲基膦酸和草甘膦的检测。可供广大分析工作者参考。

图谱：

添加回收结果

茶叶中氨甲基膦酸和草甘膦的LC-MS/MS检测添加回收结果：