发布:
北京迪科马科技有限公司时间:
2019-12-31行业:
制药/化妆品 化妆品
样品准备
(1) 取1 g样品,加入3mL饱和氯化钠溶液,5 mL提取液*,涡旋1 min,6000 rpm下离心2 min,收集上清液;
(2) 将下层残留物再用5 mL提取液*重复提取一次,合并两次提取上清液;
(3) 将上清液用提取液*定容至10 mL,混匀,取5 mL上清液并加入2.5 mL正己烷,混匀待净化。 提取液*:甲基叔丁基醚:正己烷=3:1
SPE柱净化——ProElut PSA 1 g/6 mL (Cat.#:63206)
(1)活 化: 向柱中加入5 mL甲基叔丁基醚:正己烷=1:1,弃去流出液;
(2)上 样: 将待净化液加入柱中,弃去流出液;
(3)淋 洗: 向柱中加入5 mL正己烷,弃去流出液;
(4)洗 脱: 向柱中加入5 mL甲醇,收集流出液;
(5)重新溶解: 将洗脱液在40 ℃缓慢通入氮气吹至1 mL,再用二氯甲烷定容至1 mL,供HPLC分析。
色谱柱:Diamonsil C18(2),250 mm×4.6 mm,5μm(Cat# 99603)
流 速:1.0mL/min
检测器:*UV 280nm
柱 温:30℃ 进样量:20 μL
流动相:A:水 B:甲醇 t(min)0<80%A>; 10<50%A>; 15<30%A>;16<80%A>; 25<80%A>
*本方法中,目标化合物是由HPLC测定的,但这并不表明其他仪器不适合。当使用者采用其他方式进行检测时,同样可以采用本方法进行样品前处理。