KDN型系列定氮仪故障与处理方法

【概述】

KDN型系列定氮仪（蛋白质测定仪）是本公司自行设计自行制造，采用化学与物理学相结合完成蛋白质含量测定的成套仪器。本仪器以经典的凯氏定氮法为工作原理，以快速、准确、低耗为目标，研制而成的新一代蛋白质测定仪。

本仪器主要有KDN型系列蒸馏装置和HYP系列消化装置两大装置组成：KDN型蒸馏装置采用了电热蒸汽发生器，特定的微机程序控制；从而能满足不同地区不同水质的安全使用；保证在长时间不更换蒸馏水的条件下正常工作。节约了大量的蒸馏水和化验成本。能连续不断地进行微量和常量蒸馏作业。电加热消化装置采用温控数显，使用温度正确直观，密封圈由耐强酸碱的聚四氟乙烯材料加工制成，温度可在室温～500℃任意调节，同时可消化四、八、十四、二十、四十个试样。在不需要通风橱的条件下消化管内溢出的SO2等有害气体，全部通过毒气罩，经过抽气泵溶于水中排入下水道；详情见消化装置说明书。

【实验/设备条件】

【样品提取】

蛋白质换算系数表（GB5009.5-2016）

【实验/操作方法】

使用说明

1.  仪器和用具

1.1  分析天平：感量0.0001g

1.2  实验室用粉碎机或研钵

1.3  酸式滴定管：25ml或10ml

1.4  锥形瓶：容积250ml或300ml

1.5  分样筛：孔径0.45mm(40目)

2.  试剂

2.1  盐酸（HCl）：分析纯（GB/T622-2006）0.05moI/L标准液，（4.2ml盐酸，注入1000ml蒸馏水）碳酸钠法标定盐酸。

2.2  氢氧化钠（NaOH）：分析纯（GB/T629-1997），40g溶于蒸馏水中溶成100ml，配成40%水溶液（m/V）。

2.3  硼酸（H3BO3）：分析纯（GB/T628-2011）2g，溶于蒸馏中水配成100ml 2%水溶液（m/V）。

2.4  混合指示剂：溶液Ⅰ：准确称取0.1g溴甲酚绿（C21H14Br4O5S）（HG/T4017-2008），溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100 ml。

溶液Ⅱ：准确称取0.2g甲基红（C15H15N3O2）（HG/T3449-2012），溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100 ml。

取30 ml溶液Ⅰ、10 ml溶液Ⅱ，混匀即可。阴凉处保存（保存期三个月以内）。

2.5  硫酸铜（CuSO4·5H2O）分析纯（GB/T665-2007）10g；硫酸钾（K2SO4）（GB/T16496-1996）分析纯150g，在研钵中研磨，仔细混匀过40目筛（催化剂）。

2.6  浓硫酸(H2SO4)化学纯（GB/T625-2007）（含量98%、无氮）。

2.7  蒸馏水：为实验室用三级水、电导率（25℃，ms/m）≤0.50，电阻率（25℃，MΩ·cm）≥0.2。

3.  样品制备

3.1  选取有代表性的样品，挑拣干净，按四分法缩减取样，粉碎至40目筛通过，装于密封容器中。（取样不少于200g）

3.2  液体试样，必须有代表性，取样后，先放在消化管内浓缩至体积（三分之一）再加入催化剂及硫酸进行消化。

4.  操作步骤

4.1  消化操作：详细步骤见消化装置说明书

4.2  蒸馏：

4.2.1  蒸馏前准备

 安装仪器，具体步骤如下所示：

a.将进水管的一头拧到冷凝水进水口，另外一头拧到自来水龙头上。出水口和排水阀分别用黑色胶管连接，另一头放入下水道即可。

b.接通电源

注意：接通电源时，必须关闭总电源开关、蒸汽开关、碱开关

注意：溶液桶桶口放置位置需低于仪器工作台台面，务必将溶液桶放置在地上。

4.2.2  蒸馏操作

a.  打开水龙头，使自来水进入冷凝管进水口胶管。（注意水流量以保证冷凝管起到冷却作用为止）

b.  开总电源开关(19)，待水位指示灯(6)亮，开蒸汽开关（9）直至蒸汽导出管（2）放出蒸汽，关蒸汽开关（9）。

c.  在蒸馏接收管托架上，放上已经加入适量（15ml左右）的接收液（硼酸和混合指示剂）的锥形瓶，使蒸馏接收管的末端浸入接收液内。

d. 在消化完全冷却后的消化管内，逐个加10ml左右蒸馏水稀释样品，如微量蒸馏，先将消化液移至定容瓶内定容，然后按需移液至消化管内。

e．提起左侧消化管抬架升降柄（5），将消化完全冷却后的消化管套在防溅管密封圈(3)上，稍加旋转使其保持接口密封，拉下防护罩。

f. 加碱：开碱开关（8），加入适量NaOH溶液至蒸馏液颜色变棕褐色为止，关碱开关（8）。(注意：如仪器连续数天停止使用，必须先吸空胶管和碱泵内的碱液，然后用10﹪的盐酸或硼酸溶液过滤胶管和碱泵，再用蒸馏水过滤一次即可)。

g. 开蒸汽开关（9），节水阀自动开启，自来水进入冷凝管循环管路，开始蒸馏，直至氨气全部蒸出（全量蒸馏接收液体积约为150ml；微量蒸馏接收液体积约为100ml）。先将接收瓶取下，取洗瓶（蒸馏水）冲洗接收管。再关蒸汽开关（9）。

4.3  滴定：

4.4  吸收氨后的接收液，用标定后的盐酸溶液进行滴定，溶液由蓝绿色变为灰紫色为终点。

4.5  空白测定：用0.1g糖代替样品或不加样品作空白测定。

4.6  测定结果计算：

4.6.1 测定计算公式：

式中：V2 —滴定试样时消耗酸标准溶液的体积（ml）

V1 —滴定空白时消耗酸标准溶液的体积（ml）

V —试样分解液总体积（ml）

V′—试样分解液蒸馏用体积（ml）

      C  —酸标准溶液的mol/L浓度

      K  —氮换算成粗蛋白质的系数

W  —试样重量（g）

      0.0140—氮的毫克当量数

4.6.2  平行测定的结果用算术平均值表示，保留小数点后二位。

4.6.3  结果报告中必须注明氮换算成粗蛋白质的系数。换算系数见下表。

【实验结果/结论】

【仪器/耗材清单】

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