荧光素标记抗体技术

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(一) 原理

目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗达明(Lis

samine rhodamine B200, RB200)在硷性条件下 FITC 的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的氨基共价结合，标

记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力在荧光灯源紫外线或兰紫光激发下产生黄绿色荧光，通过在荧

光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性定位或定量的检测

(二) 操作步骤

将纯化的 IgG 抗体对 PH9～9.5 碳酸盐缓冲液透析过夜，

透析后抗体液移入小烧杯中