实时飞行时间质谱直接分析快速测定血清代谢组指纹图谱的
体液的代谢组指纹图谱能够揭示许多代谢异常相关性疾病的发病原因,从而成为疾病诊断和ZL预后诊断的潜在工具本文报导了一种将实时直接分析(DART)与飞行时间质谱(TOF MS)联用的快速方法,用该方法对人血清代谢组指纹图谱进行了分析在本研究中,首先对血清样品进行蛋白沉淀处理,并通过衍生化提高代谢物的挥发性,然后进行DART MS分析用同体积健康人血清样品优化了电离气体温度和流速等仪器参数,获得了DART MS的**性能实验表明这些参数对所检测代谢物全质量范围及DART质谱图信噪比有显著影响每次DART分析只需要1.2分钟,在此过程中可以按时间顺序观察到1500多张不同的特征图谱用手动取样臂得到的总离子信号重现性为4.1% 到4.5%DART MSZ令人感兴趣的特点是高通量无记忆效应和简单性,因此有望成为代谢组指纹图谱研究极宝贵的工具
代谢组指纹图谱,一种基于代谢模式或指纹图谱对样品分类的无偏差全面筛查方法,已经在尿血浆血清和体液等各种生物样品类型上进行了实验核磁共振(NMR)和质谱是代谢组指纹图谱研究广泛使用的两种分析平台NMR的优势是几乎不用进行样品处理,更容易获得大量数据,但成本高灵敏度低是它的两个主要缺陷气相色谱-质谱(GC-MS)和液相色谱-质谱(LC-MS)是代谢组学工作流程中常用的两项补充技术除非常复杂以外, GC-MS和LC-MS还有分析通量低和有色谱记忆效应等缺点,尤其是在研究生物基质(如血清)中的代谢物时为了克服上述局限,人们还在不断研究能有效分析代谢组学的技术
实时直接分析(DART)是一种在室温和大气压条件下操作的基于等离子体的电离技术属于大气压等离子体电离技术,该技术包括直接大气压光电离(DAPPI)实时直接分析(DART)流动大气压辉光放电?(FAPA)等离子体辅助解吸附电离(PADI)低温等离子体(LTP)电离和介质阻挡放电电离(DBDI)等DART以记忆效应Z小的非接触方式电离样品可以手动处理,也可以通过自动进样器辅助,主要的消耗品是高纯压缩气体(氦气或氮气),每个样品的分析成本较低DART的工作原理是,首先在气流(氮气或氦气)中发生辉光放电,形成的亚稳原子与大气压中的水发生相互作用,生成质子化的水簇这些clusters通过质子转移与热气流解吸附的分析物发生作用在大多数情况下,不经过样品制备即可发生直接电离DART已成功用于制药产品仿冒药物细菌脂肪酸调料和香料等分析领域
本文报导了一种用DART-TOF和DART-Q-TOF MS快速分析人血清代谢组指纹图谱的方法讨论了各种实验参数的优化,通过极ng确质量测定和添加实验,对血清代谢物进行了鉴定用DART离子源与Q-TOF质谱联接,用DART进行血清代谢组学研究的工作,迄今尚未见文献报导 DART®-MS 实时直接分析质谱系统 DART® SVP 实时直接分析-质谱系统
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